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NEORABIO
技术服务
通过基因工程手段定向设计和生产生物分子的技术
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分子蛋白检测>
GST pull down
GST pull down
GST pull-down是研究体外蛋白互作的技术。原理是将 GST 融合的诱饵蛋白固定在谷胱甘肽琼脂糖珠上,与含猎物蛋白的样品孵育,捕获互作复合体。经洗涤后,通过电泳、免疫印迹或质谱鉴定猎物蛋白。可验证已知互作或筛选新蛋白,需设 GST 对照,常与体内实验互补。
服务流程
应用场景
技术优势
项目主要结果展示
咨询入口
服务流程
诱饵蛋白与猎物蛋白原核表达(客户提供或由NeoraBio构建)——诱饵蛋白与猎物蛋白的诱导表达——诱饵蛋白与猎物蛋白的纯化——蛋白互作结果分析
应用场景
直接互作验证:确认酵母双杂交/质谱筛选的蛋白对 互作结构域定位:构建诱饵蛋白截断体,鉴定关键结合域 药物靶点筛选:检测小分子化合物是否阻断特定蛋白互作 病原体蛋白-宿主互作:研究病毒蛋白劫持宿主因子的机制
技术优势
高特异性与低背景:GST标签本身无哺乳动物同源物,显著减少非特异结合 可控性强:诱饵蛋白为重组纯化蛋白,浓度、状态精确可控 直接互作证据:严格证明蛋白间体外直接结合,排除细胞中介导因子干扰 灵活的功能域解析:可自由设计截断体/点突变体,精确定位互作区域 兼容多种样本:猎物蛋白可来源于细胞裂解液、体外翻译系统、甚至纯化蛋白 成本低且操作简便:无需特殊设备,GST标签纯化流程成熟稳定
项目主要结果展示
提供高分辨率的清晰图片,准确、客观、可信的检测数据和分析结果 1.相互作用蛋白鉴定结果,质谱鉴定结果和(或)western blot鉴定结果 2.完整实验报告(包括详细实验步骤及GST pull down结果相关的图表)
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