亲和力检测是评估分子间相互作用的重要手段，在药物开发、抗体筛选和生物标志物研究中具有关键作用。我们提供基于表面等离子共振（SPR）、生物层干涉（BLI）、微量热量法（MST）和等温滴定量热法（ITC）的亲和力检测服务，帮助研究人员深入理解靶标与配体之间的相互作用。
服务流程
[客户提供蛋白或小分子样品信息] → [检测平台选择与方法建立] → [亲和力实验执行与实时监测] → [数据分析与参数提取] → [结果解读与报告交付]
应用场景
用于验证蛋白与小分子、蛋白与蛋白、蛋白与抗体等相互作用的强度与特异性
评估先导化合物与靶点之间的结合亲和力，为药物筛选提供定量支持
比较不同结构改造后化合物的结合能力，指导结构优化
研究突变体或变构调节因子对结合能力的影响
分析结合动力学参数（Ka、Kd、Koff），揭示作用机制与结合稳定性
用于筛选高亲和力抗体或配体，在抗体药开发和分子伴侣筛选中应用广泛
配合其他实验（如功能验证、结构解析）构建完整的作用机制研究体系
技术优势
我们拥有多平台检测技术，涵盖SPR、BLI、ITC、MST，满足不同样品和需求
具备成熟的实验流程与方法优化经验，确保数据准确性和重复性
支持多样化样品形式，包括纯化蛋白、细胞裂解液及复杂生物样品
实时监测结合过程，获取动力学和热力学参数，全面解析结合机制
专业团队具备丰富的生物物理与药物研发背景，提供专业数据解读和建议
配备先进设备和软件，支持自动化、高通量亲和力检测服务
提供定制化解决方案，灵活适配客户项目需求，助力药物研发全流程
项目主要结果展示
- 表面等离子共振（SPR）：通过实时监测分子相互作用，提供高灵敏度的结合动力学参数（如Kd、kon和koff）。适用于多种分子，包括蛋白质、核酸和小分子，能够为药物开发提供关键数据。
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SPR原理示意图
- 生物层干涉（BLI）：利用光干涉原理，快速、无标签地测量分子间的相互作用。BLI具有高通量筛选能力和操作简便的优势，适合动态观察结合过程。
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BLI原理示意图
- 微量热量法（MST）：通过监测分子结合过程中产生的热变化，评估结合亲和力。MST适用于复杂样品和低浓度目标，能够提供精确的结合数据。
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MST原理示意图
- 等温滴定量热法（ITC）：直接测量分子结合时的热变化，提供结合亲和力、热力学参数（如ΔH、ΔS）等信息。ITC适合于小分子与大分子之间的相互作用研究，能够全面了解结合机制。
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ITC原理示意图
经典案例
利用SPR技术筛选人参皂苷中的活性成分
研究思路
该课题组使用亲和质谱与Biacore联用的方式开展了相关探究。经亲和质谱分析，该团队从人参皂苷的粗提物中，找到了潜在21个作用组分；随后，使用Biacore的Binding level screen实验模块开展了片段筛选实验（Fragmentlibrary screening），该团队从binding level (＞20 RU）、RSD (＜30%)、P (＜0.05)多个维度，筛选出15个潜在作用组分。随后，研究人员使用Biacore对其中5个高潜作用组分进行了Affinity screen。结果表明：这些高潜作用组分与P53的亲和力都要强于已知的稳定剂PhiKan083；其中，(S)-PPT与P53的亲和力最强。
主要结果
亲和质谱与Biacore对人参皂苷提取物进行高通量筛选
P53与人参皂苷中5个组分及阳性对照PhiKan083亲和力（左）野生型或突变体P53与(S)-PPT亲和力（右）
最后使用Biacore与荧光共振技术联用的方式，进一步确认了(S)-PPT发挥抗肿瘤效果的作用方式。使用Biacore实验，证实了P53与相关信号通路中上调基因(miR-760)、下调基因(miR-493-5p)均存在较强结合，证实了P53在相关信号通路中的重要性。此外，荧光共振的实验结果也表明(S)-PPT分子对P53-DNA的相互作用有促进效果。
P53与上调/下调基因的亲和力表征数据，A/B为SPR实验，C/D为荧光偏振实验
参考文献
Wang Z, Wu W, Guan X, Guo S, Li C, Niu R, Gao J, Jiang M, Bai L, Leung EL, Hou Y, Jiang Z, Bai G. 20(S)-Protopanaxatriol promotes the binding of P53 and DNA to regulate the antitumor network via multiomic analysis. Acta Pharm Sin B. 2020 Jun;10(6):1020-1035. doi: 10.1016/j.apsb.2020.01.017. Epub 2020 Feb 5. PMID: 32642409; PMCID: PMC7332671.
交付内容
亲和力检测报告及原始数据
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